自己免疫疾患におけるT細胞のエピトープ・スプレディング仮説に対する反証

研究課題名	自己免疫疾患におけるT細胞のエピトープ・スプレディング仮説に対する反証
レコードタイプ	研究実績報告
報告年度	2002
研究期間	2002-2003
研究課題番号	14370161
研究代表者	山本一彦　 (ヤマモト,カズヒコ)　東京大学・医学部附属病院・教授
研究代表者番号	80191394
研究機関	東京大学　研究機関番号：12601
研究分担者	三崎義堅　 (ミサキヨシカタ) 　東京大学・医学部附属病院. 　講師　 (60219615) 　　駒形嘉紀　 (コマガタヨシノリ) 　東京大学・医学部附属病院. 　助手　 (60281995)
研究種目	基盤研究(B)　研究種目コード：310
審査区分	一般　区分コード：03
研究分野[2]	内科学一般　研究分野コード：631
キーワード	自己免疫 / エピトープ / T細胞 / T細胞クローン / 病態形成性T細胞
研究概要	本研究では、自己免疫疾患の完成期にもT細胞に関してエピトープ・スプレデイングの現象が働いているのか、それとも限られたエピトープに関するT細胞クローンが病態形成に関わっているかを明らかにすることを目的とした。すなわち複数の自然発症自己免疫疾患モデルマウスにおいて、経時的に集積T細胞クローンの数が減少し、異なる病変間で同一のT細胞クローンが集積することを確認すると同時に、それらの集積T細胞クローンの細胞表面マーカーや産生サイトカインなどの性状を明らかにし病態形成性のあることを推定した上で、このように同定した代表的なクローンについて、試験管内でその抗原特異性と機能を再構築した上で最終的に病態形成性があることを示すことを目的とした。平成14年には、今まで経時的な解析を行ってきたHTLV-1Taxトランスジェニックマウスの関節炎モデルに加えて、自然発症ループスモデルであるNZB/W F1マウス、MRL/lprマウスを用た。それぞれのモデルマウスでの関節炎、腎炎、間質性肺炎などについて同一個体の複数の病変組織からRNAを別々に抽出し、TCRのβ鎖に関するRT-PCRとSSCP法を組み合わせた集積T細胞クローン解析を行った。この際、表面マーカーでの細胞分離により、CD4、CD8陽性T細胞別の解析、その他、CD69などの活性化マーカー別の解析も行った。その結果、腎、肺、中枢神経において、CD4陽性の同一クローンが異なる病変間に存在することが判明した。
発表文献	Kawahata K. et al.：　 "Peripheral tolerance to a nuclear autoantigen ; dendritic cells expressing a nuclear autoantigen lead to persistent anergic state of CD4^+ autore active T cells after proliferation" 　J. Immunol. 168. 　1103-1112　 (2002) 　 Kawahata K. et al.：　 "Generation of CD4^+ CD25^+ regulatory T cells from autoreactive T cells simultaneously with their negative selection in the thymus and from nonauto reactive T cells by endogenous TCR expressin" 　J. Immunol. 168. 　4399-4405　 (2002) 　 Iikura M. et al.：　 "Streptmycininduced anaphylactic shock during oocyte retrieval procedures for in vitro fertilization" 　J. Allergy. Clin. Immunol. 109. 　571-572　 (2002) 　 Kono H.et al.：　 "Spatial raft coalescence represents and initial step in FcγBR signaling" 　J. Immunol. 169. 　193-203　 (2002) 　 Yoshimura C. et al.：　 "Activation makers of human basophils : CD69 expression is strongly and preferentially induced by IL-3" 　J. Allergy. Clin. Immunol. 109. 　817-823　 (2002) 　 Takahama H. et al.：　 "T-cell clonotypes specific for dermatophagoides pteronyssinus in the skin lesions of patients with atopic dermatitis" 　Human. Immunol. 63. 　558-566　 (2002)