抗体をキャリアーとした血管新生抑制因子遺伝子導入による慢性関節リウマチの治療

研究課題名	抗体をキャリアーとした血管新生抑制因子遺伝子導入による慢性関節リウマチの治療
レコードタイプ	研究実績報告
報告年度	2002
研究期間	2001-2003
研究課題番号	13670486
研究代表者	齋藤和義　 (サイトウ,カズヨシ)　産業医科大学・医学部・講師
研究代表者番号	30279327
研究機関	産業医科大学　研究機関番号：37116
研究分担者	田中良哉　 (タナカヨシヤ) 　産業医科大学・医学部. 　教授　 (30248562)
研究種目	基盤研究(C)　研究種目コード：320
審査区分	一般　区分コード：03
研究分野[2]	内科学一般　研究分野コード：631
キーワード	慢性関節リウマチ / 細胞接着 / 遺伝子導入 / 血管新生抑制因子
研究概要	関節リウマチ(RA)の炎症滑膜内血管内皮細胞上に特異的に発現する分子に対する抗体を作成し、これをキャリアーとして、血管新生抑制因子遺伝子を炎症滑膜部位で発現させ、炎症滑膜局所で血管新生を制御し、炎症細胞の滑膜内浸潤・滑膜細胞増生を抑止するImmunogene therapyの確立を目的とし、まずICMA-1抗体を担体として至適条件の設定を行った。2価架橋剤sulfo-succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate (sulfo-SMCC)を用いて、抗ICAM-1抗体とpoly (L-lysine)を架橋しpoly (L-lysine)修飾抗体を作成する。このpoly (L-lysine)修飾抗体とヒトIL-10発現ベクターDNAをインキュベートして抗体-DNA接合体を作成する。抗ICAM-1琉体-遺伝子接合体をICAM-1遺伝子をstableに発現させたCOS-7細胞(ICAM-l COS)および関節リウマチ滑膜細胞株E11に遺伝子導入した。抗体-遺伝子接合体の添加で、ICAM-1 COSおよびE11細胞の72時間後の上清においてILISAでIL-10を検出し得た。以上より、抗原特異的に遺伝子導入する方法が滑膜細胞にて可能であると考えられた。今後、さらに抗体としてFab fragmentを使用し遺伝子導入効率を向上させること、アンギオスタチン発現ベクターを抗体と接合し、プライマリーの滑膜細胞への遺伝子導入を検討する。