| 研究課題名 | HIVミモトープワクチンの開発 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 2003 |
| 研究期間 | 2001-2003 |
| 研究課題番号 | 13670463 |
| 研究代表者 | 松下 修三 (マツシタ,シュウゾウ) 熊本大学・エイズ学研究センター・教授 |
| 研究代表者番号 | 00199788 |
| 研究機関 | 熊本大学 研究機関番号：17401 |
| 研究種目 | 基盤研究(C) 研究種目コード：320 |
| 審査区分 | 一般 区分コード：03 |
| 研究分野[3] | 内科学一般（含心身医学） 研究分野コード：7201 |
| キーワード | ミモトープ / HIVワクチン / ファージライブラリー / 中和抗体 |
| 研究概要 | 我々は昨年までにclaid-Bのヒト免疫不全ウイルス(human immunodeficiency virus type1:HIV-1)の60%を中和できるモノクローナル抗体RC25を用いてファージベクターライブラリー(PhD-12,NEB)をスクリーニングし、反応エピトープを持つファージを絞り込んだ。さらに、RC25と交叉反応を示さない中和抗体0.5βとRIE324-12の反応性をドットブロット法で調べ、交叉反応の強い6種のミモトープ(NSV, APE, APS, SDF, YPW, YPL)を同定し合成ペプチドを作製した。これらをKLHに結合させ、動物に免疫したところ、十分な力価の抗ペプチド抗体を認めたが、HIV感染細胞への反応性は弱く、中和活性も検出できなかった。今年度はこれに加え、RIE324-12抗体を用いてファージをスクリーニングしたが、反応クローンは得られなかった。ファージ上での抗原構造が合成ペプチドでは失われるのではないかと考え、NSVファージそのもので家兎を免疫し、ペプチドカラムで特異抗体を精製、分析したところ、弱いながらも反応性と中和活性が認められた。今年度はまた、ファージキャプチャーアッセイの実験系を作り抗原の立体構造を保ったまま交叉反応性を検討した。今年度新たに同定したIGGというRC25反応性ファージにNSV, APEについて検討したが、有意な交叉反応性は認められなかった。これまでの研究では理想的な交叉反応性のペプチド配列を同定できなかったが、立体構造を保った状態での解析のシステムが構築できた。HIVに対するワクチン開発は世界的規模の重要課題であり、その開発には広範囲のウイルス株に対する中和抗体の誘導が不可欠である。未だに世界中の研究者が解決できない難題であり、今後も研究開発を継続する予定である。 |
| 発表文献 | Yoshimura, K.：
"The impact of highly active antiretroviral therapy by the oral route on the CD8 subset in monkeys infected chronically with SHIV_<89.6P>"
J.Virol.Methods. 121.
121-128
(2003)
Koito, A： "Susceptibility of mink (Musteravision)-derived cells to replication by human immunodeficiency virus type-1" J.Virol. 77. 5109-5117 (2003) Koito, A： "Ability of small animal cells to support post integration phase of human immunodeficiency virus type 1 replication" Virology 305. 181-191 (2003) Kimura, T： "Reconstitution of spontaneous neutralizing antibody response against autologous HIV-1 in chronically infected patients during highly active antiretroviral therapy" J.Infectious Diseases 185. 53-60 (2002) Wang, FX： "Emergence of autologous neutralization-resistant variants from pre existing quasi species during viral-rebound of human immunodeficency virus type-1 infected patients under treatment of highly active anti retroviral therapy (HAART)" J.Infectious Diseases 185. 608-617 (2002) Matsushita, S： "Advance in treatment strategy and immune reconstruction against HIV-1 infection" Microbiol.Immunol. 46. 231-239 (2002) Matsushita, S： "XIV International AIDS Conference 2002" Monduzzi Editore. 8 (2002) |