リポ蛋白代謝及び動脈硬化発生におけるアポ蛋白AIIの役割

研究課題名	リポ蛋白代謝及び動脈硬化発生におけるアポ蛋白AIIの役割
レコードタイプ	研究実績報告
報告年度	2004
研究期間	2004-2004
研究課題番号	16790181
研究代表者	孫慧君　 (ソンケイクン)　筑波大学・大学院・人間総合科学研究科・助手
研究代表者番号	00361329
研究機関	筑波大学　研究機関番号：12102
研究分担者	範江林　 (ファンジャンリン) 　筑波大学・大学院・人間総合科学研究科. 　助教授　 (60272192)
研究種目	若手研究(B)　研究種目コード：260
研究分野[3]	病態医化学　研究分野コード：6906
キーワード	トランスジェニック / リポ蛋白 / アポ蛋白 / 動脈硬化 / 脂質代謝 / 高脂血症 / 動物モデル / 遺伝子導入
研究概要	アポ蛋白A-II(アポAII)は高比重リポ蛋白(HDL)の約25%を占める主要アポ蛋白であり、主に肝臓で合成される。しかし、アポAIIの生理機能および動脈硬化との関係はまだ解明されてない。本研究では、リポ蛋白代謝および動脈硬化の発生におけるアポAIIの直接的役割、病理的意義を明らかするために、ヒトアポAII遺伝子は本来アポAIIを有していないウサギに導入することによって、アポAIIを発現するトランスジェニック(Tg)ウサギの作製を目的とした。本年度では肝臓で特異的に発現するアポEプロモーターを有する発現ベクターとヒトアポAII c DNAとを構築した。それを用いて、876個のウサギ受精卵に注入し、28羽の仮親ウサギに移植した。得られた59羽の仔ウサギのうち、4羽がポジであった。ウサギの血清をSDS-PAGEで分析したところ、2羽のウサギはヒトアポAII蛋白を発現していることが確認された。さらに、ELISA法にて血清のアポAIIの濃度を測定した。トランスジェニックウサギのアポAIIの濃度は〜5mg/dlでヒトより低いことがわかりました。また、超遠心法によりヒトアポAIIはウサギのHDLに存在していることも確認されています。現在これらのTgウサギを用いて、コレステロール食投与実験によりアポAIIの動脈硬化の発生・進展における役割を検討している。今後、アポAII発現レベルの高いFounderウサギの作製を計画している。