| 研究課題名 | 脳酸化ストレス蓄積マウスの作製と解析 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 2004 |
| 研究期間 | 2003-2004 |
| 研究課題番号 | 15790156 |
| 研究代表者 | 清水 孝彦 (シミズ タカヒコ) 財団法人東京都高齢者研究・福祉振興財団・東京都老人総合研究所・研究員 |
| 研究代表者番号 | 40301791 |
| 研究機関 | (財)東京都高齢者研究・福祉振興財団 研究機関番号：82604 |
| 研究種目 | 若手研究(B) 研究種目コード：260 |
| 研究分野[3] | 医化学一般 研究分野コード：6905 |
| キーワード | MnSOD / 活性酸素 / 酸化ストレス / Cre-loxpシステム / 脳特異的欠損マウス / 神経変性 / ミトコンドリア / 個体老化 |
| 研究概要 | MnSODは活性酸素の大部分が産生されるミトコンドリアで活性酸素を処理する生体防御にとって重要な酵素である。全身性のMnSOD欠損マウスは拡張性心筋症を伴い胎生期から新生児期に死亡する。そのため長期的な活性酸素傷害はヘテロマウスを用いて解析されてきた。しかし、ヘテロマウスは正常に発育・成長するため、酸化ストレスによる傷害を個体レベルで解析できない。そのため我々はCre-loxpシステムを用いて組織特異的にMnSODが欠損できるモデルマウス(MnSOD floxマウス)の作製を行った。全身でCreリコンビナーゼタンパク質を発現するCAG-Creマウスと交配し、欠損マウスが胎生致死であることを明らかにし、Cre-loxpシステムが予想通り働くことを報告した。さらに肝臓特異的MnSOD欠損マウスを作製し、肝臓におけるMnSODの欠損が肝機能に影響を与えないことを明らかにした。本研究では、脳・神経系での特異的なMnSOD欠損マウスを作製し、神経変性過程における活性酸素蓄積、および酸化ストレス傷害の病理的役割を明らかにすることを目的に研究を行った。ラットネスチン遺伝子プロモーターの下流にCreリコンビナーゼ遺伝子を組み込んだNestin-CreマウスとMnSOD floxマウスを交配し、脳特異的MnSOD欠損マウスの作製を行った。その結果、欠損マウスはメンデルの法則に従い誕生し、胎生致死は認められなかった。しかし、脳特異的MnSOD欠損マウスは生後2週から有意に成長遅延と運動障害を呈し、生後4週までに100%死亡することが判明した。また、脳の広い範囲でMnSODが欠損すると空胞変性を伴う激しい神経変性が生じることを明らかにした。これらの結果から神経系においては、発育の初期に活性酸素傷害により、神経変性がもたらされることが判明した。 |
| 発表文献 | Nakai, D., et al.：
"Coq7/clk-1 regulates mitochondrial respiration and the generation of reactive oxygen species via coenzyme Q."
Aging Cell 3・5.
273-281
(2004)
Morimoto, A., et al.： "Analysis of the Secondary Structure of β-Amyloid (Aβ42) Fibrils by Systematic Proline Replacement." J.Biol.Chem. 279・50. 52781-52788 (2004) Kaneko, H., et al.： "Fibrous Component of the Blastocoelic Extracellular Matrix Shapes Epithelia in Concert with Mesenchyme Cells in Starfish Embryos." Dev.Dyn. 232・4. 915-927 (2005) Huang, F., et al.： "Tissue hyperoxygenation promotes oxidative metabolism in motor unit." J.Neurosci.Res. (in press). (2005) Baba, T., et al.： "Estrogen, insulin, and dietary signals cooperatively regulate longevity signals to enhance resistance to oxidative stress in mice." J.Biol.Chem. (in press). (2005) Uchiyama, S., et al.： "A superoxide dismutas/catalase mimetic extends the lifespan of short-lived mev-1 mutant but not the wild type strain in Caenorhabditis elegans" Aanti-aging.Med.Res. (in press). (2005) |