| 研究課題名 | 転写因子E2F1によるp53フアミリー蛋白質p73の負の制御機構 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 2004 |
| 研究期間 | 2003-2004 |
| 研究課題番号 | 15590261 |
| 研究代表者 | 尾崎 俊文 (オザキ トシノリ) 千葉県がんセンター・生化学研究部・上席研究員 |
| 研究代表者番号 | 40260252 |
| 研究機関 | 千葉県がんセンター(研究所) 研究機関番号：82504 |
| 研究分担者 | 中川原 章
(ナカガワラ アキラ)
千葉県がんセンター・研究局.
局長
(50117181)
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| 研究種目 | 基盤研究(C) 研究種目コード：320 |
| 審査区分 | 一般 区分コード：03 |
| 研究分野[3] | 医化学一般 研究分野コード：6905 |
| キーワード | p53 / p73 / E3 ligase / ubiquitin / proteasome / RanBPM / UFD2a / apoptosis |
| 研究概要 | 我々は酵母のtwo-hybrid法を用いたスクリーニングの結果、p73結合蛋白質の一つとしてRan結合蛋白質であるRanBPMを同定した。過剰発現系による免疫沈降実験およびGST pull-down assayから、RanBPMはp73αのカルボキシ末端領域に結合することが判明した。一方、RanBPMとp53の相互作用は検出されなかった。さらに、RanBPMはp73αの転写活性化能ならびにアポトーシス誘導能を増強する機能を持つことが認められた。興味深いことに、RanBPMはp73αのユビキチン化を阻害し、その半減期を延長させることが明らかになった。従って、RanBPMとの結合によってマスクされるp73αのカルボキシ末端領域に存在するリシン残基が、ユビキチン化の標的である可能性が示唆された。また、我々はシスプラチンによるアポトーシス誘導過程において、U-box型E3/E4ユビキチンリガーゼであるUFD2aの発現低下を伴うp73の蛋白質レベルでの安定化を見い出した。実際にUFD2aはp73と結合し、その過剰発現によってプロテアソーム依存性のp73の分解が促進し、その転写活性化能ならびにアポトーシス誘導能の顕著な阻害が観察された。さらに、アンチセンスRNAを用いて内在性のUFD2aをノックダウンさせると、p73の半減期の延長および転写活性化能の昂進が認められた。一方、UFD2aはp53の安定性および活性に対しては影響を及ぼさなかった。興味深いことに、UFD2aによるp73の分解においてはユビキチン化の誘導は検出されず、さらにE3/E4ユビキチンリガーゼ活性を欠くUFD2aの変異体も、p73に対する分解活性を保持していた。従って、p73の安定性はユビキチン依存性およびUFD2aによるユビキチン非依存性の蛋白質分解システムによる制御を受けている可能性が示唆された。 |
| 発表文献 | Aoyama, M., Ozaki, T., et al.：
"LMO3 interacts with neuronal transcription factor, HEN2, and acts as an oncogene in neuroblastoma."
Cancer Res. (in press).
(2005)
Hanamoto, T., Ozaki, T., et al.： "Identification of protein kinase A catalytic subunitβ(PKA-Cβ) as a novel binding partner of p73 and regulation of p73 function." J.Biol.Chem. (in press). (2005) Lin, L., Ozaki, T., et al.： "Topors, a p53 topoisomerase I-binding RING finger protein, is a co-activator of p53 in growth suppression induced by DNA damage." Oncogene (in press). (2005) Kramer, S., Ozaki, T., et al.： "Protein stability and function of p73 are modulated by a physical interaction with RanBPM in mammalian cultured cells." Oncogene 24. 938-944 (2005) Takahashi, M., Ozaki, T., et al.： "Decreased expression of the candidate tumor suppressor gene ING1 is associated with poor prognosis in advanced neuroblastomas." Oncogene 12. 811-816 (2004) Ando, K., Ozaki, T., et al.： "Polo-like Kinase 1(Plk1) inhibits p53 function by physical interaction and phosphorylation." J.Biol.Chem. 279. 25519-25561 (2004) |