| 研究課題名 | 上皮細胞の形態形成に関わるタンパク質群の同定と機能解析 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 2004 |
| 研究期間 | 2003-2004 |
| 研究課題番号 | 15390090 |
| 研究代表者 | 古瀬 幹夫 (フルセ ミキオ) 京都大学・医学研究科・助教授 |
| 研究代表者番号 | 90281089 |
| 研究機関 | 京都大学 研究機関番号：14301 |
| 研究種目 | 基盤研究(B) 研究種目コード：310 |
| 審査区分 | 一般 区分コード：03 |
| 研究分野[3] | 医化学一般 研究分野コード：6905 |
| キーワード | 上皮細胞 / 細胞極性 / 細胞間接着 / 細胞骨格 / GFP / 細胞膜ドメイン |
| 研究概要 | 平成16年度は、上皮細胞に特有な構造の中でも細胞間接着構造濃縮するタンパク質を同定することにターゲットを絞りスクリーニングを行った。発現cDNAライブラリーとして、新たにマウス唾液腺由来細胞株であるCSG細胞から作製したものを用いたところ、前年度に作製したマウス乳腺由来上皮細胞株Eph4のcDNAライブラリーに比較してクローニングされる既知タンパク質のバックグラウンドが低いことが明らかになったため、専らこのcDNAライブラリーを使用した。その結果、細胞間接着構造に濃縮するという意味で新規なタンパク質を数種類同定することに成功し、前年度に得られたものと合わせて解析を行った。個々のタンパク質に対する抗体を作製してマウス組織における発現と細胞内局在を調べるとともに、様々な欠失変異体を作製して細胞間接着構造への局在化に必要な領域を決定した。個々のタンパク質に関する詳細は以下の通りである。 1)homer2 シナプス後膜に局在し様々なタンパク質を集積させる裏打ちタンパク質のサブタイプ。上皮細胞間接着構造のうちアドヘレンスジャンクション(AJ)に局在することを明らかにした。2)abLIM3 神経系、あるいは網膜においてアクチン繊維と相互作用して機能することが知られている未発表のabLIMのサブタイプ。肺、および筋組織の血管内皮細胞のAJに局在することを明らかにした。3)新規コイルドコイルタンパク質 多くの上皮細胞、血管内皮細胞のAJ付近に局在する。小胞状にも分布することから、細胞間接着と小胞輸送の未知の相互作用を担うことが期待される。 現在これらの分子について、培養上皮細胞における強制発現およびRNAiによる発現抑制を行い、機能解析を進めている。 |
| 発表文献 | Ohnishi H., Nakahara T., Furuse K., Sasaki H., Tsukita S., Furuse M：
"JACOP, a novel plaque protein localizing at the apical junctional complex with sequence similarity to cinaulin"
J.Biol.Chem 279.
46014-46022
(2004)
Hashizume A., Ueno T., Furuse M., Tsukita S., Nakanishi Y., Hieda Y.： "Expression patterns of claudin family of tight junction membrane proteins in developipa mouse submandibular gland" Dev.Dyn. 231. 425-431 (2004) Umeda K., Matsui T., Nakayama M., Furuse K., Sasaki H., Furuse M., Tsukita S.： "Establishment and characterization of cultured epithelial cells lacking expression of ZO-1" J.Biol.Chem. 43. 44785-44794 (2004) Matsuda M., Kubo A., Furuse M., Tsukita S.： "A peculiar internalization of claudins, tight junction-apecific adhesion molecules, during the intercellular movement of epithelial cells" J.Cell Sci. 117. 1247-1257 (2004) |