遺伝子の時空的発現パターンを指標にした細胞分画による網膜幹細胞の純化・同定


研究課題名 遺伝子の時空的発現パターンを指標にした細胞分画による網膜幹細胞の純化・同定
レコードタイプ 研究実績報告
報告年度 2004
研究期間 2003-2004
研究課題番号 15390088
研究代表者 渡邉 すみ子  (ワタナベ スミコ) 東京大学・医科学研究所・助教授
研究代表者番号 60240735
研究機関 東京大学 研究機関番号:12601
研究種目 基盤研究(B) 研究種目コード:310
審査区分 一般 区分コード:03
研究分野[3] 医化学一般 研究分野コード:6905
キーワード 網膜 / 増殖 / 分化 / 表面抗原 / 細胞系譜 / 電気生理 / 抗体 / 移植
研究概要 未分化なマウス網膜の抗体を使って表面抗原の発現によりセルソーターを用いて分離し、これを網膜explant培養系、再凝集系、培養系に移植し、増殖能、分化能を観察する、というやり方で、未分化網膜の指標となる表面抗原を探索した。その結果、約120種類の抗体の中から、SSEA-1,c-kitに対する抗体が効率良く未分化な網膜細胞を標識することを見いだした。また他の数個の抗体が分化した網膜の指標となることを見いだし、網膜細胞系譜の決定を行なうと同時に表面抗原をマーカーとして細胞を単離して移植、再生を行う系を確立した。
一方でSP (Side population)については網膜ではその出現が一定せず、未分化細胞の指標とは現在のところ、なり得ないと考えている。
また網膜細胞の成熟の指標として電気生理的手法を取り入れることを計画したが、まずカルシウムの流入によりカルシウムチャネルが存在するかどうかについて検討を開始した。マウスの胎生16日から生後10日目までの胎児由来の網膜を培養皿に蒔いた状態でのカルシウムの濃度測定の条件を確立した。
発表文献 Kubota, Y.:   "Isolation and expression patterns of three angiopoietin-related proteins in zebrafish."  Mech.Dev. (In press).   (2005)  
Satoh, S.:   "Identification of a novel splicing form of zebrafishp73 having strong transcriptional activity"  Biohem.Biophys.Res.Comm. 325.  835-842  (2004)  
Muto, H:   "Identification and characterization of Veph, a novel gene encoding a PH domain-containing protein expressed in the developing central nervous system of vertebrates."  Biochimie 86.  523-531  (2004)  
Tabata, Y.:   "Specification of retina fate of mouse embryonic stem cellsby ectopic expression of Rx/rax, a homeobox gene."  Mol.Cell.Biol. 24.  4513-4521  (2004)  
Kurita, R.:   "A novel smoothelin-like actin-binding proteins required for choroidal fissure in zebrafish."  Biochem.Biophys.Res.Comm 13.  1092-1100  (2004)  


 

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