| 研究課題名 | 志賀毒素が血管内皮を傷害する分子機構の網羅的検討 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 2005 |
| 研究期間 | 2004-2005 |
| 研究課題番号 | 16590374 |
| 研究代表者 | 吉田 友昭 (ヨシダ トモアキ) 愛知医科大学・医学部・助教授 |
| 研究代表者番号 | 70210705 |
| 研究機関 | 愛知医科大学 研究機関番号：33920 |
| 研究種目 | 基盤研究(C) 研究種目コード：320 |
| 審査区分 | 一般 区分コード：03 |
| 研究分野[3] | 細菌学(含真菌学) 研究分野コード：6911 |
| キーワード | 志賀毒素 / Two hybrid法 / 細胞内輸送 / アポトーシス / 蛋白相互作用 |
| 研究概要 | 志賀毒素の活性サブユニットは、宿主細胞にエンドサイトーシスされた後、細胞内のTrans Golgi networkで蛋白分解酵素の作用を受けて活性化されて、Golgi stackを経て細胞質に移行し、リボゾームでの蛋白合成を阻害することによって細胞毒性を発揮することが知られている。しかしながら、その細胞内での輸送メカニズムなどは不明な点が多い。平成16年度には、志賀毒素の活性サブユニットが相互作用をする細胞内タンパク質を、大腸菌をホストとしたtwo hybrid法で網羅的に検索し、small glutamine-rich tetratricopeptide repeat containing-α(SGT)という蛋白と相互作用する可能性が示された。この分子は、細胞質で、細胞骨格や成長ホルモンレセプターの細胞内ドメインと相互作用して、細胞分裂やエンドサイトーシスに関わることが示唆されている分子である。平成17年度は、この分子に対するsiRNAを、我々独自の実験系である、ヒト血管内皮の初代培養系に移入してその発現を抑制した状態で毒素を作用させると、細胞傷害活性が抑制されることが確認された。また、網羅的な蛋白相互作用検索の結果は、SGTと毒素の活性サブユニットのみを大腸菌に発現させたtwo hybrid法で確認できたが、一方で、毒素活性サブユニットがホスト細胞内において蛋白分解酵素で処理された後の分子は、SGTとの相互作用は確認できず、毒素が細胞へ取り込まれた後、Trans Golgi networkに達するプロセスにSGTが関与していることが示唆された。 |
| 発表文献 | Yoshida T, Koide N, Mori I, Ito H, Yokochi T：
"Chlamydia pneumoniae infection enhances lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor (LOX-1) expression on human endothelial cells"
FEMS Microbiol.Let. (In press).
(2006)
Ito H, Koide N, Hassan F, Islam S, Tumurkhuu G, Mori I, Yoshida T, Kakumu S, Moriwaki H, Yokochi T.： "Lethal endotoxic shock using alpha-galactosylceramide sensitization as a new experimental model of septic shock." Lab Invest. 86. 254-261 (2006) Islam S, Hassan F, Tumurkhuu G, Ito H, Koide N, Mori I, Yoshida T, Yokochi T.： "Lipopolysaccharide prevents apoptosis induced by brefeldin A, an endoplasmic reticulum stress agent, in RAW 264.7 cells." Biochem Biophys Res Commun. 340. 589-596 (2006) Yoshida T, Usui A, Kusumi T, Inafuku S, Sugiyama T, Koide N, Yokochi T.： "A quantitative analysis of cedar pollen-specific immunoglobulins in nasal lavage supported the local production of specific IgE, not of specific IgG." Microbiol Immunol. 49. 529-534 (2005) |