| 研究課題名 | 酸素ストレスによる臓器障害:特徴的膜脂質分解反応の解析と新規治療薬開発への模索 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 1992 |
| 研究期間 | 1990-1992 |
| 研究課題番号 | 02557090 |
| 研究代表者 | 工藤 一郎 (クドウ イチロウ) 東京大学・薬学部・助教授 |
| 研究代表者番号 | 490730134612 |
| 研究機関 | 東京大学 研究機関番号：12601 |
| 研究分担者 | 梅田 真郷(ｳﾒﾀﾞ ﾏｻﾄ)：東京大学・薬学部・助手 (540510185069) 新井 洋由(ｱﾗｲ ﾋﾛﾕｷ)：東京大学・薬学部・助手 (551740167987) 高村 忠仲(ﾀｶﾑﾗ ﾀﾀﾞﾉﾌﾞ)：エーザイ株式会社・研究開発部・主任研究員 |
| 研究種目 | 試験研究(B) 研究種目コード：122 |
| 研究分野[1] | 生物系薬学 研究分野コード：773 |
| キーワード | 虚血 / ホスホリパ-ゼA_2 / 肝障害 |
| 研究概要 | 昨年までに、四塩化炭素で惹起したラット肝臓傷害モデルで、内在性のホスファチジルエタノ-ルアミンの加水分解が比較的低濃度のカルシウム依存的に進むこと、この加水分解におそらくII型ホスホリパ-ゼA_2(PLA_2)が関わっていることを明らかにしてきた。本年度は、以下の検討を行った。 (1)傷害肝臓のホモジネ-トから抽出した脂質画分に、II型PLA_2活性を上昇させる画分があることを見い出した。即ち、脂質画分を酵素反応液に添加してII型PLA_2のin vitroでの酵素活性に対する影響を調べたところ、添加する脂質の量に依存して活性が約3倍まで上昇した。障害肝由来の脂質を添加した場合に観察されるPLA_2活性化反応では、酵素活性に必要なカルシウムイオン濃度の要求性が正常肝臓由来の脂質の場合に比べて低下した。 (2)傷害肝臓由来の全脂質をシリカカラムで分画したところ、PLA_2活性を上昇させる作用を持つ画分がホスファチジルエタノ-ルアミン近傍に見いだされた。正常肝臓由来の脂質を分画しても活性化作用は観察されなかった。傷害肝臓と正常肝臓との間で脂質の分画パタ-ンに大きな違いはみられず、傷害肝臓に含まれる比較的微量な脂質性分子がII型PLA_2の酵素活性を上昇させていると結論した。 (3)我々は、II型PLA_2が肥満細胞の脱顆粒反応にも関わっていることを示唆しているが、活性化肥満細胞由来の脂質画分にもII型酵素を活性化させる因子が存在することがわかった。以上から、酸素ストレスにカップルした組織損傷の進行あるいは肥満細胞脱顆粒反応においてII型PLA2の酵素活性を促進させる脂質が生成し、活性調節すると結論した。 |
| 発表文献 | Makoto MURAKAMI: "Release of 14-kDa group-II Phospholipase A_2 from ativated mast cells and its possible involvement in the regulation of the degranulation process" Eur.J.Biochem. 209. 257-265 (1992) Makoto MURAKAMI: "Molecular Nature of Phospholipases A_2 Involved in Prostaglandin I_2 Synthesis in Human Umbilical Vein Endothelial Cells" THE JOURANL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY. 268. 839-844 (1993) 工藤 一郎: "高等動物非膵型ホスホリパ-ゼA_<>:構造,性状,機能" 生化学. 64. 1330-1344 (1992) |