肥満細胞と炎症関与他細胞間における細胞機能相互調節作用に関する生物薬学的研究

研究課題名	肥満細胞と炎症関与他細胞間における細胞機能相互調節作用に関する生物薬学的研究
レコードタイプ	研究実績報告
報告年度	1992
研究期間	1992-1992
研究課題番号	02404079
研究代表者	市川厚　 (イチカワアツシ)　京都大学・薬学部・教授
研究代表者番号	402010025695
研究機関	京都大学　研究機関番号：14301
研究分担者	福井哲也(ﾌｸｲﾃﾂﾔ)：京都大学・薬学部・助教授 (480890111971)
研究種目	一般研究(A)　研究種目コード：070
研究分野[1]	生物系薬学　研究分野コード：773
キーワード	肥満細胞 / プロスタグランジン / プロスタサイクリン / プロスタグランジンE_2 / MARCS蛋白 / ヘムオシゲナ-ゼ / △^<12>-PGJ_2
研究概要	本年度の研究計画に従い、以下のような知見を得た。 1.肥満細胞におけるプロスタグランジン類の作用:(1)IL-3依存性増殖肥満細胞株(BNu-c12)において、プロスタサイクリンは、促進性G蛋白を介してアデニル酸シクラ-ゼを活性化した。(2)この活性化は、Cキナ-ゼ活性化剤のホルボ-ルエステルの添加により顕著に増大した。(3)Cキナ-ゼによる活性化反応はカルモジュリン(CaM)阻害剤のW-7で阻害された。(4)透過性細胞ではプロスタサイクリンの効果はないがCaM-Ca^<2+>付加により発現する。(5)Cキナ-ゼの基質はCaMにより活性化した分子量60kDaのMARCS(myristylated alanine rich C kinase sub strate)であることを明らかにした。現在、Cキナ-ゼを活性化する生体内リガンドを検索している。 2.プロスタグランジン受容体の遺伝子解析:(1)マウス肺のトロンボキサンA_2受容体のcDNAをクロ-ニングし、一次構造を解析した。(2)マウス癌化肥満細胞のPGE_2受容体のcDNAをクロ-ニングし、PGE_2のサブタイプ三種類ある中でその二種類の受容体(EP_2とEP_3)のcDNAをクロ-ニングし、それらの一次構造とノザンハイブリダイゼ-ションによりmRNAの組織分布を明らかのした。また、サブタイプのEP_3には、そのC末端がRNAスプライシングにより転換した二種類がさらにあり、これらはリガンド結合の親和性、G蛋白とのカップル様式、脱感作の発現の有無、組織発現性などにおいて異なることからPGE_2の生理作用の多様性を説明するものと考える。 3.肥買細胞のPGD_2の血清変換物質である△^<12>-PGJ_2は、血管内皮細胞の核に結合し、ヘム代謝に重要なヘムオキシゲナ-ゼの転写を促進するという新たな肥満細胞の機能を発見した。
発表文献	Hiroshi Kawai: "Synergistic effect of 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate and dexamethason on denovo synthesis of histidine decarboxylase in mouse mastocytoma P-815 cells" Biochim.Biophys.Acta. 1133. 172-178 (1992) Tomoko Miyazaki: "Synergistic effects of cyclic AMP and Ca^<2+> ionophore A23187 on denovo synthesis of histidine decarboxylase in mastocytoma P-815 cells" Biochim.Biophys.Acta. 1133. 179-186 (1992) Yukihiko Sugimoto: "Cloning and expression of a cDNA for mouse prostaglandin E receptor EP_3 subtype" J.Biol.Chem.267. 6463-6466 (1992) Tohru Sawai: "Enhancement by protein kinase C of prostacyclin receptor-mediated activation of adenylate cyclase through a calmodulin/myristylated alanine-rich C kinase substrate(MARCKS)system in IC2 mast cells" J.Biol.Chem.268. 1995-2000 (1993)