| 研究課題名 | 脳内の亜鉛イオン依存性チロシンホスファタ-ゼの生理機能の解明 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 1995 |
| 研究期間 | 1995-1995 |
| 研究課題番号 | 07672398 |
| 研究代表者 | 藤本 貞毅 (フジモト サダキ) 京都薬科大学・薬学部・教授 |
| 研究代表者番号 | 80090182 |
| 研究機関 | 京都薬科大学 研究機関番号：34306 |
| 研究種目 | 一般研究(C) 研究種目コード：090 |
| 研究分野[2] | 生物系薬学 研究分野コード：683 |
| キーワード | チロシンホスファタ-ゼ / イノシト-ル-1-ホスファタ-ゼ / 酸性ホスファタ-ゼ / イノシト-ル-1-リン酸 / 亜鉛イオン / マグネシウムイオン / 脳 / 生理機能 |
| 研究概要 | 【目的】脳中のZn^<2+>イオン依存性チロシンホスファタ-ゼは、酸性条件(pH5.5)で、Zn^<2+>イオン存在下、P-nitrophenyl phosphateならびにphosphotyrosineの脱リン酸化反応を触媒する酵素であるが、生理機能は不明である。今回、生体内基質に関する知見を得ることを目的として、生理的条件下における本酵素の金属イオンの要求性ならびに基質特異性を詳細に検討した。 【結果】本酵素はpH7.4(Tres-HCl buffer)において、Mg^<2+>イオンの存在下でmyo-inositol-1-monophosphate、myo-inositol-2-monophosphate, 2-AMP, 2-GMP, α-glycerophosphate, およびβ-glycerophosphateに対してよく作用した。中でもmyo-inositol-1-monophosphateに対して最もよく作用し、最適pHは8付近に認められた。しかしこれらの条件下では、p-nitrophenyl phosphateやphosphotyrosineに対する作用は非常に低かった。Mg^<2+>イオン以外の金属イオンでは、活性化効果は小さかった。なお、使用した酵素標品はSDS-PAGEにおいて単一であり、しかもこの標品をSephadex G-100ならびにMono Qカラムクロマトグラフィ-にかけて、Zn^<2+>イオン依存性p-nitrophenyl phosphatase活性とMg^<2+>イオン依存性myo-inositol-1-phosphatase活性の溶出曲線を比較する時、両酵素活性は全く同じ挙動を示した。 【考察、結論】本酵素は酸性条件下では、亜鉛イオン依存性のp-nitrophenyl phosphatase(チロシンホスファタ-ゼ)活性を示すが、生理的条件下ではMg^<2+>イオン依存性のmyo-inositol-1-phosphatase活性を示す酵素であることを明らかにし、結果を現在投稿中である。さらに、本酵素に対する特異抗体を作成して、この抗体を用いて組織分布、細胞内局在性を調べるとともに、既に牛脳から精製されているmyo-inositol-1-phosphataseとの関連について検討中である。 |
| 発表文献 | Sadaki Fujimoto: "Zinc-ion-dependent acid phosphatase exhibits magnesium-ion-dependent myo-inositol-1-phosphatase activity" Biol. Pharm. Bull.19(in press). (1996) |