| 研究課題名 | サイトカインJE遺伝子のレドクス制御の分子機構 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 1996 |
| 研究期間 | 1995-1996 |
| 研究課題番号 | 07672382 |
| 研究代表者 | 野瀬 清 (ノセ キヨシ) 昭和大学・薬学部・教授 |
| 研究代表者番号 | 70012747 |
| 研究機関 | 昭和大学 研究機関番号：32622 |
| 研究分担者 | 江川 清(ｴｶﾞﾜ ｷﾖｼ)：昭和大学・薬学部・講師 (00095879) 真下 順一(ﾏｼﾀ ｼﾞｭﾝｲﾁ)：昭和大学・薬学部・助手 (60054045) |
| 研究種目 | 基盤研究(C) 研究種目コード：320 |
| 審査区分 | 一般 区分コード：03 |
| 研究分野[2] | 生物系薬学 研究分野コード：683 |
| キーワード | 活性酸素 / JE遺伝子 / NFκB / 転写 |
| 研究概要 | 増殖・免疫応答の調節に関わるJE遺伝子は、各種の増殖因子により発現誘導を受ける。本研究はこのJE遺伝子の転写誘導に活性酸素が関与することを分子レベルで証明するため、JE遺伝子5'上流転写制御領域の中で活性酸素に応答するエレメントを固定し、さらにこのDNAエレメントに結合する転写因子を分離することを目的とする。 第一に、Balb 3T3細胞をTNFα、血清、ホルボ-ルエステルTPAなどで処理し、JE遺伝子発現をmRNAレベルで検討したところ、TPAによる誘導が活性酸素消去剤で抑制されることが明らかとなった。蛍光試薬と共焦点レ-ザ-顕微鏡で、細胞内の酸化状態もTPA処理で上昇し、活性酸素消去剤はこの上昇を阻害することが確認できた。次に、CATレポ-タ-を用いた解析から、JE遺伝子上流-1600〜-1100塩基の範囲に活性酸素に応答する領域があることが明らかとなった。そこでこの部位のDNAを約100塩基ずつに分画したDNA断片をサブクロ-ニングし、これらをプロ-ブとしたゲルシフトアッセイにより、活性酸素応答に関与するエレメントを固定した。その結果TPAで活性化され、活性酸素消去剤の影響を受ける核内因子はNFκBであることが推定された。以上の結果、発癌プロモ-タ-TPAは、細胞からの活性酸素産生を高め、この活性酸素がNFκBを活性化することによりJE遺伝子の転写が誘導されることが示された。 |
| 発表文献 | NOSE,K.& Ohba,M.: "Functional activation of the egr-1 gene by bydregen peroxide" Biochem.J.316. 381-383 (1996) Patel,Camoly,Amthol,Nose a caroke20GB02:Cloning and ealy dorsnl axial expression of Fhk.: Develop. Biology. 178. 327-342 (1996) Arate,Hamaquler a Nose: "Inhibition of Niheills by the expression of the HSP27" J.Cin.Physiol.170. 19-26 (1997) |