| 研究課題名 | 血管内皮細胞でのEph受容体による細胞内・細胞間情報伝達機構の研究 |
| レコードタイプ | 研究実績報告 |
| 報告年度 | 2004 |
| 研究期間 | 2002-2004 |
| 研究課題番号 | 14380342 |
| 研究代表者 | 望月 直樹 (モチヅキ ナオキ) 国立循環器病センター研究所・循環器形態部・部長 |
| 研究代表者番号 | 30311426 |
| 研究機関 | 国立循環器病センター(研究所) 研究機関番号：84404 |
| 研究分担者 | 尾西 裕文
(オニシ ヒロフミ)
国立循環器病センター研究所・循環器形態部.
室長
(80092542)
増田 道隆 (マスダ ミチタカ) 国立循環器病センター研究所・循環器形態部. 室長 (00190364) |
| 研究種目 | 基盤研究(B) 研究種目コード：310 |
| 審査区分 | 一般 区分コード：03 |
| 研究分野[3] | 細胞生物学 研究分野コード：5805 |
| キーワード | 情報伝達系 / チロシンキナーゼ / 受容体 / 細胞間接着 / 血管新生 |
| 研究概要 | Eph受容体下流のシグナル分子としてVsm-RhoGEF (Vascular smooth muscle specific RhoGEF)分子を同定していた。本分子はRhoの特異的な活性化因子であると考えていたが、詳細に調べたところRacファミリー分子の活性化因子としても機能した。Vsm-RhoGEF分子の細胞内局在を調べたところ、アクチンストレスファイバーに局在していた。さらに、興味深いことに、ephrin-A1刺激により、ストレスファイバーから消失し、細胞膜のラッフリング部位に移動した。この結果から、ephrin-EphA4刺激でVsm-RhoGEFはRhoとRacへのシグナルを伝えることで、細胞の収縮と伸展に貢献することがわかった。 Eph受容体刺激で、低分子量GTP結合蛋白質が活性化されるが、このなかでR-Rasファミリー分子も活性化されることが予想された。このため、R-Rasファミリー分子のエフェクター分子の検討を行った。これまでミオシンIXにはRas association(RA)domainがあるが、どのRasファミリー分子と結合するかは明らかにされていなかったので、本研究ではR-rasファミリー分子に注目した。R-Rasファミリー分子(TC21,R-Ras, M-Ras)の中で、TC21,R-RasがミオシンIXのRAドメインに特異的に結合することを明らかにした。この結合はGTP結合型R-Rasでのみみとめることから、R-Rasの活性化にしたがってミオシンIXが制御される可能性を示す結果となった。 Eph受容体の刺激依存性のエンドサイトーシスを検討した。Eph受容体は細胞表面に発現するephrinをリガンドとするのでリガンド刺激依存性に、細胞内へ取り込まれるか否かは検討されていなかった。本研究で可溶性ephrinをEph-EGFPキメラ蛋白を発現する血管内皮細胞に投与したところ、エンドサイトーシスが惹起されることを証明した。細胞間シグナルでも、同様にエンドサイトーシスが誘導されることが予想された。 |
| 発表文献 | Fukuhara S, et al.：
"Cyclic AMIP potenciates VE-cadherin-mediated cell-cell contact to enhance endothelial barrier function through an Epac-Rap1 signaling pathway."
Mol.Cell.Biol. 25.
133-146
(2005)
Endo A, et al.： "Identification and characterization of zipper-interacting protein kinase as the unique vascular smooth muscle myosin phosphatase-associated kinase." J.Biol.Chem. 279. 42055-42061 (2004) Ohki T, et al.： "Transmission of force and displacement within the myosin molecule." Biochemistry 43. 13707-13714 (2004) Kamioka Y, et al.： "A novel dynamin-associating molecule, forming-binding protein 17, induces tubular membrane invaginations and participates in endocytosis." J.Biol.Chem. 279. 40091-40099 (2004) Yoshizaki H, et al.： "Cell Type-specific Regulation of RhoA Activity during Cytokinesis." J.Biol.Chem. 279. 44756-44762 (2004) Ishida J, et al.： "Regulatory roles for APJ, a seven-transmembrane receptor related to angiotensin-type 1 receptor in blood pressure in vivo" J.Biol.Chem. 279. 26274-26279 (2004) |